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蜀科低速冷凍離心機分離β-胡蘿卜素
發布時間:2017-07-13   點擊次數:837次

  β—胡蘿卜素是一種抗氧化劑,具有解毒作用,是維護人體健康不可缺少的營養素,在抗癌、預防心血管疾病、白內障及抗氧化上有顯著的功能,并進而防止老化和衰老引起的多種退化性疾病。蜀科低速冷凍離心機可以有效分離β-胡蘿卜素,是各科研機構和生物公司開展研究、生產的好幫手。接下來小編為大家介紹分離的過程。

  葉綠素廠在提取葉綠素后的廢液小含有一定量胡蘿卜素,而且由于葉綠素被提取,在利用離心機分離胡蘿卜素時.可以減少葉綠素對胡蘿卜素的干擾。因此,這是比較好的提取胡蘿卜素的原料。胡蘿卜素常用的分離方法是氧化鋁柱層析。

1.廢液的預處理
  取葉綠素廠廢液5mL于離心管中,置于蜀科
低速冷凍離心機中,進行平衡操作后,1000 r/min離心15min。取上層黃色液體于50ml梨形分液漏斗中。加25ml石油醚(沸程為30一60℃),充分混勻。

2.氧化鋁層析柱的準備

  取100g氧化鋁于灰化爐中加熱至400℃,保持3h,使水分完全蒸發成活性氧化鋁。此時的氧化鋁為Ⅰ級,適當吸收空氣中的水分(約3%)后,成Ⅱ級,然后,用石油醚將活性氧化鋁調制成糊狀,備用。另取1支20 mm×300 mm的玻璃層析柱,關閉閥門,加入三分之一體積的石油醚、再將糊狀的話性氧化鋁慢慢地加入到玻璃層析柱中,同時打開層析柱的閥門,讓其中的石油醚慢慢地流出,有利于氧化鋁的沉降。當氧化鋁裝至層析柱的8D%時,停止加氧化鋁,待氧化鋁完全沉降。

3.加樣層析和洗脫

  裝好層析柱,同時打開層析柱的閥門和分液漏斗的閥門,使分液漏斗中的樣品慢慢地加入到氧化鋁層析柱中。觀察氧化鋁由于加入樣品后顏色的變化。當前沿的顏色伸展至柱高度的二分之一時,關閉分液漏斗和層析柱的閥門,停止加樣。另取1個250mL分液漏斗,內裝石油醚:丙酮=9:l的混合溶液作為洗脫劑,安裝好層析裝置,分別打開分液漏斗和層析柱的閥門,讓洗脫劑慢慢流經層析柱。當顏色前沿到達層祈柱底部時,注意觀察并記錄色帶的分離情況。*條帶(從底部往上數),是α-胡蘿卜素,第二條帶是β-胡蘿卜素,第三條帶是γ—胡蘿卜素,再往上是其他類胡蘿卜素及其他色素。本實驗要求收集β-胡蘿卜素組分。用50mL燒杯收集β-胡蘿卜素洗脫液。

4.沉淀

  將洗脫液于50℃水浴中加熱使溶劑揮發.然后,在殘留物中加lv仿使之溶解后再用乙醇沉淀,如發現有白色沉淀物質產生,還需用蜀科低速冷凍離心機,控制轉速在2000r/min狀態下進行離心將其去除。在上清液中再加乙醇,得到的棕褐色沉淀,即為β-胡蘿卜素。稱量,記錄總重量。
  蜀科
低速冷凍離心機使用非常廣泛,了解更多應用案例,請繼續關注蜀科儀器相關。

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